Papel de las vesículas extracelulares en el diagnóstico y patogenia del colangiocarcinoma

Abstract

El colangiocarcinoma (CCA) incluye un grupo heterogéneo de cánceres biliares con mal pronóstico y que se relacionan con diversos factores de riesgo como la presencia de colangitis esclerosante primaria (PSC). No existen biomarcadores no invasivos sensibles y específicos para el diagnóstico diferencial de PSC, CCA y carcinoma hepatocelular (HCC). En los últimos años, las vesículas extracelulares (EVs) han surgido como importantes herramientas en la búsqueda de biomarcadores para diversas patologías y como importantes reguladores en la progresión de múltiples enfermedades. El presente estudio tiene como objetivo principal determinar posibles biomarcadores proteicos presentes en EVs de suero que permitan diagnosticar PSC, CCA y HCC. Se aislaron EVs de suero de pacientes, así como EVs derivadas de células de CCA humano y colangiocitos humanos (NHC), y se caracterizó su morfología (mediante microscopía electrónica), tamaño/concentración (mediante nanoparticle tracking analysis (NTA)) y presencia la de marcadores proteicos de EVs CD63, CD81 y CD9 (por immnunoblot). El análisis del contenido proteico de EVs de suero por espectrometría de masas (MS) reveló la presencia de biomarcadores sensibles y específicos para el diagnóstico diferencial de PSC, CCA y HCC. Además, la determinación del contenido proteico de EVs secretadas por células de CCA humano mediante MS identificó el enriquecimiento en diversas proteínas oncogénicas relacionadas con la progresión tumoral del CCA en comparación con EVs derivadas de NHC. Por último, se identificaron proteínas humanas en EVs de suero de ratones con implantes orto-tópicos de CCA humano, indicando que los tumores de CCA son capaces de secretar EVs que pueden ser detectadas en suero y participar en su patogenia. Por tanto, estos datos indican que las EVs de suero albergan biomarcadores diagnósticos para la PSC, CCA y HCC y que las EVs secretadas por las células de CCA pueden participar en la patogenia de este tumor.