Detección del sexo de mitílidos por métodos de PCR cuantitativa

Abstract

[ES] La herencia doble uniparental (DUI) es una forma de herencia del genoma mitocondrial presente en ciertas familias de bivalvos, en virtud de la cual los individuos poseen dos tipos de DNA mitocondrial: uno heredado por línea paterna (M mtDNA) y otro por línea materna (F mtDNA). En este trabajo se explora la posibilidad de desarrollar un método molecular de sexado basado en este fenómeno, proponiéndose como objetivo cuantificar ambos tipos de mtDNA y utilizar sus proporciones relativas (F/M) para establecer el sexo de mejillones (Mytilus galloprovincialis). Para ello, mediante primers específicos se amplificó por qPCR un fragmento de la secuencia del citocromo b de ambos mtDNA en 30 muestras de tejido gonadal y 9 de hemolinfa, para posteriormente comparar los resultados del sexado por observación microscópica de la gónada con la determinación del sexo basada en las proporciones F/M en esos tejidos. Los resultados de este experimento permiten concluir que la identificación del sexo por qPCR presenta un éxito del 83% y del 100%, en tejido gonadal y hemolinfa, respectivamente. De esta forma, la validez de este método queda demostrada, así como su aplicabilidad asociada a técnicas no letales de obtención de muestras, como es la extracción de hemolinfa.