La vía de regulación sonic hedgehog como diana terapéutica en tumores pediátricos malignos del sistema nervioso

Abstract

La presente tesis propone el estudio de la vía de regulación sonic hedgehog en tumores pediátricos malignos, como son el meduloblastoma y el neuroblastoma. El tema de estudio se introduce mediante una descripción del desarrollo del sistema nervioso, diferenciando el origen neuroectodérmico del meduloblastoma, del origen de los neuroblastomas a partir de la cresta neural. Posteriormente se especifican los genes reguladores más importantes de la vía sonic: GLI, SMO, PTCH , SUFU y HHIP, asícomo la localización celular y la función de las proteínas codificadas por esos genes. Los dos primeros codifican proteínas que actúan como reguladoras positivas de la vía, mientras que los tres últimos codifican proteínas supresoras tumorales. La hiperactividad de la vía sonic se asocia al desarrollo de diversos tipos de cáncer, entre ellos los sujetos a estudio en esta tesis.Tras revisar las alteraciones genéticas más importantes de estos tumores, se pasó al estudio experimental,que constó de las siguientes fases: 1) Expresión de los genes asociados a la vía sonic, incluyendo el estado de metilación de los promotores de los genes supresores tumorales. 2) Modelo de inhibición invitro de la vía sonic, mediante ciclopamina, que actúa inhibiendo a SMO, y mediante siRNA contra GLI.3) Respuesta celular a la inhibición de la vía sonic, atendiendo principalmente a la viabilidad celular y a la clonogenicidad en agar blando. 4) Modelo in vivo de xenotrasplante de células tratadas in vitro, y no tratadas, a ratones inmunodeprimidos.Los resultados del trabajo apuntan hacia las siguientes conclusiones: 1) La vía sonic hedgehog está activaen meduloblastomas y neuroblastomas, como se mostró a través del análisis de expresión de sus reguladores más comunes, y mediante el estudio epigenético de algunos de los genes supresores detumores. 2) La inactivación de la vía indujo una caída en la viabilidad celular y en la clonogenicidad enagar blando, lo cual es indicativo de una disminución de la tumorigenicidad in vitro en las células tratadas. 3) El modelo de xenotrasplante mostró que la ciclopamina fue capaz de reducir eficazmente la tumorigénesis in vivo de las líneas de meduloblastoma DAOY y D283Med en ratonesinmunodeprimidos, mientras que DAOY mostró una menor reducción de crecimiento tumoral queD283Med tras el tratamiento con siRNA.