Generación de distintas cepas de priones recombinantes como herramienta para el estudio del alplegamiento espontáneo en las enfermedades priónicas

Abstract

La isoforma malplegada (PrPSc) de la proteína del prion celular (PrPC), es el agente causal de las Encefalopatías Espongiformes Transmisibles (EET), un conjunto de desórdenes neurodegenerativos mortales que afectan a distintos mamíferos incluidos los humanos. La conversión espontánea de PrPC a PrPSc es la causa de enfermedad menos comprendida y la más relevante, desencadenando las EET esporádicas, que comprenden la mayoría de los casos en humanos. Sin embargo, su baja incidencia entre la población, su heretorgeneidad y la dificultad de replicarlas en modelos animales limita su estudio. En esta tesis doctoral, basándonos en la metodología de propagación priónica in vitro PMSA, y tras la modificación de algunos parámetros fundamentales, se han obtenido espontáneamente distintas isoformas de PrP recombinantes murinas malplegadas que presentan el comportamiento de un prion bona fide, siendo resistentes a la digestión con proteasas, auto-propagables e infecciosas in vivo. Durante el proceso, se identificaron potenciales confórmeros que fueron caracterizados bioquímica y biológicamente para confirmar la obtención de diferentes cepas priónicas, modelando la heterogeneidad del malplegamiento espontáneo. La PMSA permitió el estudio de la cinética del proceso de malplegamiento espontáneo de la PrP murina, metodología que se reprodujo con éxito al utilizar PrP recombinante ovina, sugiriendo el potencial de esta técnica in vitro para la formación de priones espontáneos de otras especies. Queda demostrado que esta técnica es idónea para la generación espontánea de priones recombinantes in vitro, permitiendo estudiar el fenómeno de formación de cepas y proporcionando modelos de gran interés para la comprensión de las EET esporádicas.