Structure-function of the alpha subunit of the human trimeric Gi3-protein (Gαi3)

Abstract

La tesis se centró en analizar el papel de las proteínas G, en particular GIV, en la señalización celular y su relevancia en enfermedades, como el cáncer metastásico. Se investigó un posible fármaco, IGGi-11, que se une a Gαi3.Se emplearon técnicas de resonancia magnética nuclear (RMN) para estudiar la interacción de IGGi-11con GDP-Gαi3, revelando detalles estructurales y afinidades. Se intentó cristalizar la proteína en complejo con IGGi-11 o GIV, logrando cristalizar la proteína libre, que se utilizó para acoplar el compuesto. Todos estos análisis determinaron que IGGi-11 es un inhibidor competitivo de la interacción Gαi3-GIV.Se realizaron también ensayos celulares en los que se observó que el tratamiento con IGGi-11 a células obtenidas de cáncer de mama (alta concentración de GIV) reducía la activación de las proteínas en la cascada de señalización mediada por la interacción Gαi3-GIV.Además, se investigaron otras interacciones con Gß1α2, RGS12, R6A, R6A-1 y KB1753. Se observó queIGGi-11 podía unirse a los complejos GDP-Gαi3 en concentraciones elevadas, excepto en el caso deRGS12 y KB1753.