Synthesis and applications in immunoassays of antibody-protected nanoclusters

Abstract

Los nanoclusters (NCs) han ganado atención los últimos años debido a sus propiedades ópticas y químicas dependientes del tamaño. En esta tesis se presenta el primer método para la síntesis de NCs empleando anticuerpos como andamios estructurales y sus aplicaciones en inmunoensayos. Las síntesis se realizan empleando condiciones suaves que no alteran la estructura del anticuerpo, manteniendo su estructura secundaria y sus funciones biológicas. Así, los anticuerpos modificados con NCs mantienen la afinidad por su antígeno. Los NCs resultantes según su naturaleza pueden presentar propiedades fluorescentes y fotocatalíticas (CdS NCs) o catalíticas (Ag/Pt NCs y Au/Pt NCs).Estas propiedades se han empleado para dar los primeros pasos hacia el desarrollo de un inmunoensayo homogéneo competitivo basado en FRET empleando los CdS NCs-IgG fluorescentes como donantes de energía. Los NCs bimetálicos se han empleado como anticuerpo de detección en un inmunoensayo colorimétrico tipo sándwich y se ha comparado su rendimiento con el de la comúnmente empleada enzima HRP. Empleando NCs bimetálicos se ha conseguido mejorar el límite de detección 5 veces con los Ag/Pt NCs-IgG y hasta 56 veces empleando los Au/Pt NCs-IgG en comparación con el empleo de un anticuerpo de detección marcado con HRP.