Gizakien melanoma-zelula metastasikoek askaturiko exosomen eragina melanoma-zelula metastasikoen eta ez-metastasikoen oldarkortasunean

Abstract

[EUS] Melanoma, melanozitoetatik eratorritako minbizia, giza minbizi oldarkorrenetarikoa da behin metastasia garatu denean, eta bere intzidentziak gora egin du azken urteotan. Exosomak, bestalde, endosoma goiztiarren mintzaren inbaginazioz sortzen diren mintz-besikulak dira, endosomak mintz plasmatikoarekin fusionatzean kanpo-ingurunera askatzen direnak. Exosomen bidez, jatorrizko zelulek proteinak, lipidoak eta azido nukleikoak transferitzen dizkiete itu-zelulei, eta informazio-transmisio horrek garrantzi handia du funtzio fisiologiko askotan. Melanozitoak, adibidez, exosomez baliatzen dira keratinozitoekin komunikatzeko. Melanoma garatzean, ordea, exosomen bidezko komunikazio-sistema eraldatu egiten da minbiziaren alde egiteko: askaturiko exosomen kopurua handitu egiten da, eta exosomek tumore-hazkundearekin edota metastasiarekin loturiko molekulak garraiatzen dituzte. Horrela, exosomek itu-zelulen jokabidea eraldatu eta minbiziaren garapenerako mikroingurune faboragarria lortzen dute. Lanaren helburua da A2058 giza melanoma-zelula metastasikoetatik eratorritako exosomek A2058 zelulen, COLO-800 melanoma-zelula metastasikoen eta MELHO melanoma-zelula ez-metastasikoen oldarkortasunean duten eragina aztertzea. Horretarako bideragarritasuna eta migrazio-gaitasuna aztertu dira, Presto Blue erreaktiboaren eta “zauri-itxiera” teknikaren bidez, hurrenez hurren. Neurketak exosomen presentzian zein horien gabezian egin dira, bestelako exosomarik gabeko behi-fetu serumaren kontzentrazio ezberdinetan. Emaitzek erakutsi dute A2058 zelulen exosomek bideragarritasuna eta migrazio-gaitasuna sustatzen dituztela zelula mota guztietan, eta beraz, gai direla oldarkortasun-maila ezberdineko minbizi-zelulengan eragiteko. Hala ere, behi-fetu serumaren presentziaren eragina aldakorra izan da zelula mota batetik bestera. Bestalde, zelula-kultiboen intsertuen teknika probatu da hiru zelula-lerroekin, etorkizunean, matrize konplexuagoak erabiliz, exosomek zelula horien inbasio-gaitasunean duten eragina aztertzeko helburuarekin. (Euskara)

[ES] El melanoma, el cáncer derivado de los melanocitos, es uno de los cánceres humanos más agresivos una vez desarrollada la metástasis, cuya incidencia ha aumentado en los últimos años. Los exosomas, por su parte, son vesículas membranosas producidas por la invaginación de la membrana de los endosomas prematuros, que se liberan al medio externo al fusionar los endosomas con la membrana plasmática. Por medio de los exosomas, las células originales transfieren proteínas, lípidos y ácidos nucleicos a las células diana, siendo esta transmisión de información de gran importancia en muchas funciones fisiológicas. Los melanocitos, por ejemplo, utilizan los exosomas para comunicarse con los queratinocitos. Sin embargo, al desarrollar el melanoma, el sistema de comunicación mediante exosomas se transforma para favorecer el cáncer, aumentando el número de exosomas liberados y transportando moléculas relacionadas con el crecimiento tumoral o la metástasis. De este modo, los exosomas transforman el comportamiento de las células diana y consiguen un micromedio favorecedor para el desarrollo del cáncer. El objeto del trabajo es analizar la influencia de los exosomas procedentes de células metastásicas de melanoma humano A2058 en la agresividad de células A2058, células metastásicas de melanoma COLO-800 y células de melanoma no metastásicas MELHO. Para ello se ha estudiado la viabilidad y capacidad de migración mediante el reactivo Presto Blue y la técnica de “cierre de heridas” respectivamente. Las mediciones se han realizado tanto en presencia como en ausencia de exosomas, en diferentes concentraciones de feto serum bovino sin otros exosomas. Los resultados han demostrado que los exosomas de las células A2058 fomentan la viabilidad y la capacidad migratoria en todo tipo de células, por lo que son capaces de influir en células cancerígenas con diferente grado de agresividad. Sin embargo, la influencia de la presencia del feto serum de vaca ha sido variable de un tipo de células a otro. Por otro lado, se ha probado con las tres líneas celulares la técnica de los imsersos de cultivos celulares, utilizando en el futuro matrices más complejas, con el fin de analizar la influencia de los exosomas en la capacidad invasiva de estas células